颜色保护剂的测定(1)




I.亚硝酸盐的测定

亚硝酸盐通过盐酸萘乙二胺法测定,也称为Griess试剂比色法。

1,测量原理

样品沉淀后除去脂肪,在弱酸条件下用对氨基苯磺酸重氮化亚硝酸盐,然后与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,最大吸收波长为538nm,颜色为深度在一定范围内,它与亚硝酸盐含量成正比,并且可以与标准系列相比进行量化。

2,试剂

1亚铁氰化钾溶液:称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O3,溶于水,稀释至1000mL。

2醋酸锌溶液:称取220.Og醋酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O],加入30mL冰醋酸溶于水,并稀释至1000mL。

3饱和硼砂溶液:称取5.0克硼酸钠(NaB407·10H2O),将其溶于100毫升热水中,冷却备用。

4对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL 20%盐酸中,置于棕色瓶中并混合,避光。

5盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺溶于100mL水中,混匀,

存放在棕色瓶中,远离光线。

6亚硝酸钠标准溶液(200μg/mL):精确称取0.1000g亚硝酸钠,在硅胶干燥器中干燥24h,加水溶解,稀释至500mL。

7亚硝酸钠标准溶液(5.Oμg/mL):使用前,取5.00mL亚硝酸钠标准溶液,置于200mL容量瓶中,用水稀释至刻度。

3,仪器

小型绞肉机;分光光度计。

4,操作方法

(1)样品处理:称取5.0~10.0g粉碎并混合的样品,放入50mL烧杯中,加入12.5mL硼砂饱和溶液,搅拌均匀,将样品洗至500mL约300mL容量瓶中。约70°C的热水。将混合物在沸水浴中加热15分钟并冷却至室温。在旋转容量瓶的同时加入5mL亚铁氰化钾溶液,充分摇匀,并加入5mL乙酸锌溶液以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置0.5小时,取出上层脂肪,过滤,弃去初始滤液,留下滤液备用。(2)测定:取50mL OmL上述滤液于50mL插塞比色管中,另取0.0mL,0.2mL,0.4mL,0.6mL,0.8mL,1.0mL,1.5mL,2.0mL,2.5mL亚硝酸钠标准使用溶液(5.Oμg/mL),置于50mL插塞比色管中。将2 mL对氨基苯磺酸溶液(4g/L)加入标准管和样品管中,充分混匀,静置3至5分钟,然后加入1 mL盐酸萘乙二胺溶液(2g/L),加入水到了标记。混合并静置15分钟,测量波长为538nm的吸光度,并绘制标准曲线。同时,做一个试剂空白试验。

5,计算结果

式中:X——亚硝酸盐样品含量,mg/kg;

m——样品质量,g;

M'——测定样品溶液中亚硝酸盐的质量,μg;

V1——样品处理溶液总体积,mL;

V2——测定样品体积,mL。

6,讨论

1该方法是国家标准方法GB/T 5009.33--2003标准方法,亚硝酸盐的最低检出限为1mg/kg。

2使用亚铁氰化钾和乙酸锌作为蛋白质沉淀剂,使产生的亚铁氰化锌沉淀物与蛋白质共沉淀。硫酸锌溶液(30%)也可用作蛋白质沉淀剂。

3饱和硼砂溶液的作用:亚硝酸盐萃取剂,也是一种蛋白质沉淀剂。

4对于含有较多脂肪的样品,可以去除提取物中的上层脂肪;对于有色样品,可以将氢氧化铝乳液脱色,然后进行显色反应。

5测量的水应为双蒸水以减少误差。

二,测定硝酸盐——镉柱法

1,测量原理

在用蛋白质沉淀样品溶液并除去脂肪后,通过镉柱将硝酸盐还原成亚硝酰棕榈盐。在弱酸性条件下,亚硝酸盐用对氨基苯磺酸重氮化,然后用盐酸萘酯重氮化。乙二胺偶联形成紫红色染料,测量亚硝酸盐的总量。取另一样品溶液,直接测量亚硝酸盐含量而不通过镉柱,从总量中减去样品中的原始亚硝酸盐含量以获得硝酸盐含量。2,试剂

1氨水缓冲液(pH 9.6~9.7)量取20mL盐酸,加50mL水,混匀,加50mL氨水,再加水稀释至1000mL,混匀。

2稀氨水缓冲液取50mL氨水缓冲液,用水稀释至500mL,混匀。

3酸(0.1 mol/L)。

4硝酸钠标准溶液(200μg/mL)在110~120℃下准确称取0.1232g干燥的硝酸钠,加入7k溶解,转移至500mL容量瓶中,并稀释至刻度。

5硝酸钠标准使用溶液(5.Oμg/mL)使用时,取2.50mL硝酸钠标准溶液,置于100mL容量瓶中,用水稀释至刻度。

6亚硝酸钠标准使用溶液(5.Oμg/mL)。

7盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺溶于100mL水中,充分混匀,置于棕色瓶中,贮存于黑暗中。

3.仪器(镉柱)

(1)海绵状镉的制备:将足够的锌或锌棒放入500mL硫酸镉溶液(200g/L)中。 3-4小时后,用锌代替所有镉后,轻轻地用玻璃棒。刮掉后,取出残留的锌棒,使镉沉到底部,倾析上清液,用浇注方法将水洗几次。然后,将其转移到组织捣碎器中,加入500mL水,捣碎约2秒,并将金属细颗粒用水洗涤至标准筛,并取出20-40目的部分填充柱。

(2)填充镉柱:用水填充镉柱玻璃管,放入2cm高的玻璃棉垫中。将玻璃棉压到色谱柱底部时,应将其中所含的所有空气排出。将海绵铺展至8至10cm的高度,用1cm高的玻璃棉覆盖,并在其上放置储存漏斗,并通过橡胶塞将末端与镉玻璃管紧密连接。如果没有如上所述的镉玻璃管,可以用25mL酸滴定管代替。填充铺路柱后,用25mL盐酸(0.1mol/L)洗涤,每次用水洗涤两次,每次25mL。当镉柱未被水覆盖时,请随时将水位保持在镉层之上。不要让气泡被困在层中,见图7-1。每次使用镉柱后,应用25 mL盐酸(0.1 mol/L)洗涤。用水洗涤两次,每次25mL,最后用水覆盖镉柱。

参考:食品检测技术

关键词:颜色保护剂,食品添加剂,食品检测,国家标准物质网络

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时间:2019-02-27 07:30:01 来源:凤凰彩票注册 作者:匿名